PCR實驗室布局及通風系統(tǒng)設(shè)計探討

? ? ? PCR實驗室也叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈反應(yīng)的簡稱。它是一種分子生物學技術(shù)，用于擴增特定的DNA，可視為特殊的DNA體外復(fù)制。用于基因檢測，具有靈敏度高、特異性強、快速、簡便等特色。它可以將傳統(tǒng)方法難以檢測到的較少數(shù)病毒DNA擴增一百萬倍以上，從而大大提高疾病的診斷水平。它不僅可以用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎(chǔ)研究，還可以用于疾病診斷或任何有DNA和RNA的地方，也稱為無細胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增技術(shù)。

? ? ? 1.聚合酶鏈反應(yīng)實驗室的布局。

? ? ? 聚合酶鏈反應(yīng)擴增實驗室原則上分為三個獨立的工作區(qū):試劑儲存與制備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增與擴增產(chǎn)物分析區(qū)。為了避免交叉污染，進入每個工作區(qū)嚴格遵循一個單一的方向，即只能從試劑儲存和制備區(qū)到標本制備區(qū)，再到擴增和擴增產(chǎn)物分析區(qū)。試劑和樣品在實驗區(qū)之間的轉(zhuǎn)移應(yīng)通過轉(zhuǎn)移窗口進行。

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? ? ? 2.PCR實驗室實驗室空調(diào)通風系統(tǒng)的設(shè)計及壓力控制。

? ? ?聚合酶鏈反應(yīng)實驗室對凈化水平?jīng)]有嚴格要求，但為了避免實驗區(qū)之間交叉污染的可能性，建議采用全輸送、全排放的氣流組織形式。同時，要嚴格控制送風和排風的比例，以保證各個實驗區(qū)的壓力要求。

? ? ?(1)試劑儲存和制備區(qū)。

? ? ?PCR實驗室的主要操作是貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合物的制備。用于樣品制備的試劑和材料應(yīng)直接運輸?shù)皆搮^(qū)域，不得通過其他區(qū)域。試劑原料存放在該區(qū)域，所需存放的試劑在該區(qū)域準備。為了控制氣壓，這個區(qū)域要對外界保持輕微的正壓。

? ? ? (2)標本制備區(qū)。

? ? ? PCR實驗室領(lǐng)域的主要操作是樣品保存、核酸(RNA和DNA)的提取和儲存、擴增反應(yīng)管的添加和DNA合成的測定。要求該區(qū)域的壓力梯度相對于鄰近區(qū)域為正，以避免氣溶膠污染從鄰近區(qū)域進入該區(qū)域。此外，采樣操作過程當中可能會出現(xiàn)氣溶膠污染，因此應(yīng)避免在該區(qū)域進行不必要的行走。

? ? ?(3)擴增和擴增產(chǎn)物分析區(qū)。

? ? ? 該領(lǐng)域的主要操作是DNA擴增和擴增片段的測定。此外，將制備好的DNA模板加入(從樣品制備區(qū))和將主反應(yīng)混合物制備到反應(yīng)混合物中(從試劑儲存和制備區(qū))也可以在該區(qū)域進行。PCR實驗室區(qū)域的壓力梯度需要相對于鄰近區(qū)域的負壓，以避免氣溶膠從該區(qū)域泄漏。為了避免氣溶膠造成的污染，應(yīng)該盡