蛋白純化設(shè)備的工作原理和注意事項(xiàng)

蛋白純化設(shè)備廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)研究應(yīng)用領(lǐng)域，是重要的操作技術(shù)。典型的真核細(xì)胞含有數(shù)千種不同的蛋白質(zhì)，有些很豐富，有些只包含幾個(gè)拷貝。要研究某種蛋白質(zhì)，必須先從其他蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)分子中純化出該蛋白質(zhì)。

蛋白純化設(shè)備利用顆粒不同程度的顆粒吸附力來使分離的目的達(dá)到蛋白質(zhì)的挑選吸附分離。蛋白純化設(shè)備采用低溫有機(jī)溶劑沉淀法，使用如甲醇，乙醇等與水可混溶的有機(jī)溶劑，下降多數(shù)蛋白質(zhì)的溶解度并且將其析出，和鹽析相比較，這種方法的分辨率更加的高，然而蛋白質(zhì)比較容易變形，需要在低溫下進(jìn)行。

蛋白純化設(shè)備還吸取按照分子大小不一樣的方法，在介質(zhì)中對(duì)蛋白質(zhì)離心時(shí)，蛋白質(zhì)沉降速度取決于它的質(zhì)量和密度，質(zhì)量和密度越大，那么沉降越快；凝膠過濾（一種柱層析）；高于濾（利用蛋白質(zhì)分子不可從半透膜通過的性質(zhì)）。

蛋白純化設(shè)備使用注意事項(xiàng)：

1.為了避免蛋白質(zhì)變性，不要對(duì)樣品劇烈攪動(dòng)和反復(fù)凍融。

2.緩沖溶液成分盡量模擬細(xì)胞內(nèi)環(huán)。

3.在純化分離過程當(dāng)中，均必須時(shí)刻對(duì)它的穩(wěn)定性注意維護(hù)，使它的活性得到保護(hù)，要注意避免蛋白質(zhì)的氧化，避免重金屬對(duì)目標(biāo)蛋白的破壞，避免微生物生長(zhǎng)，避免蛋白酶對(duì)目標(biāo)蛋白的降解。

4.盡可能置于冰上或者在冷庫(kù)內(nèi)進(jìn)行操作。

5.蛋白濃度不要太稀。

6.除非是進(jìn)行聚焦層，否則需要合適的pH環(huán)境，避免所使用的緩沖溶液pH與pI相同，使蛋白質(zhì)的沉淀得以避免。